液相色譜法測(cè)定食品中的激素含量

食品中激素含量的測(cè)定——液相色譜法：樣品中的激素經(jīng)提取分離后，以液相色譜儀分離測(cè)定。利用保留時(shí)間定性，峰高或峰面積與標(biāo)準(zhǔn)比較定量。

    測(cè)定方法步驟：

1 提取

    取可食用部分，搗成勻漿，稱取50g左右，置于250mL具塞錐形瓶中。加入內(nèi)標(biāo)物an眠酮20.00μg/mL貯備液1.0mL，再加甲醇-丙 酮（1：1）混合液150mL，在振蕩器上振蕩提取30min，過(guò)濾，殘?jiān)蒙倭考状?丙酮（1：1）混合液洗滌數(shù)次，洗滌并入濾液中，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器或K-D濃縮器中將溶劑蒸除。殘?jiān)?0mL甲醇溶解，經(jīng)盛有無(wú)水硫酸鈉的漏斗濾入250mL分液漏斗中，再用10mL甲醇分?jǐn)?shù)次洗滌漏斗及內(nèi)容物，洗液并入濾液中。加pH=5.2的醋酸鈉緩沖溶液80mL左右，混勻后分三次用二氯甲烷（50mL、30mL、30mL）振搖提取，合并提取液，并用無(wú)水硫酸鈉脫水，在水浴上揮干溶劑。殘?jiān)眉状既芙獠⒍ㄈ葜?0.0mL，混勻后，以3000r/min速度離心5min，取上層清液供色譜分析用。

2 色譜條件：

    色譜柱4.6mm×200mm；流動(dòng)相：乙腈-甲醇-四氫呋喃-0.01mol/L醋酸鈉溶液（20:20:10:50）；流速1.0ml/min；測(cè)定波長(zhǎng)270nm；進(jìn)樣體積10μL。

3 測(cè)定

    取供色譜用的樣品溶液10μL，注入液相色譜儀，以內(nèi)標(biāo)法定量。